Что такое бактериологическое исследование, как оно проводится, расшифровка результатов. Один из самых эффективных методов для диагностики половых инфекций — бактериологический посев

БАК анализ мочи – один из самых эффективных и точных видов диагностики ее пробы. Используется для выявления различного рода инфекций мочевыделительной системы организм человека. Такая система состоит из пары почек, мочеточников, мочевого пузыря и уретры. Основной функцией мочевыделительной системы организма человека является процесс образования мочи, а также ее накопление и вывод во внешнюю среду.

Что это такое?

Как было отмечено выше,бактериологический анализ мочи дает возможность определить наличие инфекций в организме. Его основным отличием от других видов исследования является срок проведения, который составляет десять дней. Моча в лабораторных условиях помещается в агар или сахарный бульон, то есть в благоприятную для бактерий питательную среду. Она помогает их росту и развитию.

При БАК анализе мочи концентрация (количество) микроорганизмов в одной единице объема биоматериала устанавливается на колониеобразующих единицах (КОЕ). Они представляют собой одну живую клетку микробов, которая дальше вырабатывает уже целую колонию микроскопических организмов.

Такой вид диагностики мочи является самым достоверным. Он может предоставить данные, которые невозможно получить при иных исследованиях мочи. Но также отмечен и его недостаток. Он заключается в длительности проведения исследования, а также высоких требованиях при сборе материала.

Показания к анализу

  • инфекций мочевыделительной системы;
  • контроля лечебной терапии;
  • уточнения выявленного заболевания;
  • рецидива текущего заболевания;
  • беременности;
  • сахарного диабета и иммунодефицита;
  • предположений на устойчивую флору к лечению антибиотиками.

Подготовка к анализу

Забор материала производится в стерильную пластиковую тару. Это должна быть утренняя средняя порция мочи (три-пять миллилитров). Емкость для сбора материала человеку выдается в лаборатории. А сама процедура забора мочи должна проводиться после правильного гигиенического туалета половых органов. При этом следует исключить антисептики. Материал для диагностики собирается до начала курса лечения препаратами антибиотиков или же в его промежутках. После такого лечения должно пройти две-три недели, прежде чем сдавать бактериологический анализ мочи.

Взятая порция мочи должна быть транспортирована в короткий период времени. Если проба материала хранится при температуре +18-20 градусов по Цельсию – на протяжении одного-двух часов. Если моча хранится в холодильной камере при температуре +4-8 градусов – в течение пяти-шести часов.

Виды анализа

Среди бактериологического анализа мочи выделяют:

  • БАК посев мочи на флору с установлением чувствительности к основному спектру антибиотиков;
  • БАК посев мочи на флору с установлением чувствительности к широкому спектру антибиотиков;
  • БАК посев мочи на флору с установлением чувствительности к основному спектру антибиотиков и бактериофагам;
  • БАК посев мочи на флору с установлением чувствительности к широкому спектру антибиотиков и бактериофагам.

Все вышеперечисленные виды диагностик позволяют правильно установить тип антибиотика для дальнейшего лечения.

БАК анализ мочи при беременности

Бактериологическая диагностика при беременности входит в основной перечень проводимых исследований. У женщин материал для данного вида исследования могут брать из влагалища, носа и мочи. Из влагалища материал берут для установления заболеваний, которые передаются половым путем. Из носа – для определения золотистого стафилококка. А пробу мочи – для установления бессимптомной или скрытой бактериурии.

БАК анализ мочи при беременности необходимо проводить два раза. Первый – при постановке на учет в женской консультации, а второй – на 36 неделе срока беременности. Но существует вероятность сдачи анализа и большее количество раз, если у беременной женщины присутствуют заболевания почек, мочевого пузыря, а также повышенное количество белка или лейкоцитов при клиническом анализе мочи.

Подготовка

Для сбора материала на исследование беременной женщине необходимо приобрести стерильную емкость, куда следует поместить среднюю порцию утренней мочи. После этого биоматериал относится в медицинскую лабораторию.

Чтобы анализ показал достоверные результаты, следует придерживаться основных рекомендаций при заборе материала. К ним можно отнести:

  • тщательный гигиенический туалет половых органов;
  • сбор средней порции материала (при заборе мочи обязательный ввод тампона во влагалище);
  • нормальный питьевой режим (обильное питье может развести концентрацию мочи и заранее вывести бактерии из организма);
  • доставку биоматериала в лабораторию в течение часа.

Интерпретация бактериологического исследования мочи

КОЕ

В расшифровке результатов часто встречается аббревиатура КОЕ. Как было отмечено выше, КОЕ – это колониеобразующая единица. Если при исследовании ее количество обнаружено в пределах 1000 КОЕ\мл, то это будет свидетельствовать о наличии микробов в образце материала, которые случайно попали из половых органов. В этом случае никакого лечения не требуется.

Когда результат анализа показывает количество колониеобразующих единиц 1000000, значит, в наличии имеется воспалительный процесс, вызванный инфекциями половых органов. При помощи такого вида исследования определяется вид бактерий и чувствительность к препаратам антибиотиков.

Результат анализа может показать промежуточные границы, такие как 1000-10000 КОЕ\мл. Эта оценка ставится под сомнение, и саму диагностику следует провести повторно. Но в любом случае его интерпретацию должен проводить только лечащий врач.

Бактерии в моче

Часто БАК анализ показывает присутствие бактерий в моче, которые попали в нее из толстого кишечника человека. Они перемещаются из области анального отверстия к мочеиспускательным каналам, после чего проникают в мочевой пузырь и далее. Этот путь проникновения бактерий принято называть восходящим. Наиболее часто такой вид попадания микробов встречается у женщин из-за их анатомического строения. Существует также и нисходящий путь, при котором микроорганизмы проникают в мочу во время возникновения инфекции в почках. При такой оценке анализа следует проводить лечебную терапию препаратами антибиотиков.

4.5 4.50 из 5 (5 Голосов)

Бактериологический посев осуществляется для изучения биологических и физико-химических свойств бактерий, которые используются для диагностики инфекционных заболеваний на основе микробов одного вида. Современные технологии позволяют получить необходимые бактерии с помощью и , которые, однако, могут показать ложные результаты, не определив возбудителя инфекции.

В зависимости от среды обитания микроорганизмы и бактерии имеют возможность размножаться. Для обеспечения интенсивно размножения бактериям необходимы температурный режим и пищевые добавки.

Условия для размножения микроорганизмов

Бактерии способны к размножению только в определенной рН среде, которая обеспечивает необходимые параметры влажности, кислотности, восстановительных параметров, вязкости и осмотических свойств . Определенный набор бактерий питаются и существуют в определенной среде, которая может быть простой, сложной, мягкой, твердой, универсальной или индивидуальной . Универсальная среда обеспечивает необходимыми условиями многие виды микроорганизмов, в то время как индивидуальная среда обеспечивает жизнедеятельность определенного вида бактерий.

Виды бактерий

Бактерии и микроорганизмы, живущие на коже и слизистых оболочках человеческого организма, являются интересной сферой изучения и диагностики болезней и используются во многих отраслях медицины. Бактерии и микроорганизмы, живущие в слизистых оболочках и на коже человека, распределяются по представителю:

  1. Постоянный обитатель организма, не несущий угрозы для здоровья и не способствующий развитию заболеваний. Однако исчезновение этих бактерий приводит к появлению и развитию заболеваний. Примерами заболеваний может послужить дисбактериоз в кишечнике или бактериальный вагиноз. Данные заболевания вызваны нарушениями нормальной микрофлоры и исчезновением необходимых бактерий;
  2. Условно-патогенная микрофлора – является причиной развития болезней при высоком показателе условных патогенных микробов, размножающихся при иммунодефиците;
  3. Патогенные микробы, отсутствующие в здоровом человеческом организме . Попадая в среду размножения, провоцируют заболевания и дают начало инфекционным процессам. являются возбудителями наиболее опасных заболеваний, например, чумы, оспы, холеры и венерических заболеваний.

Назначение бактериологических посевов

Для выявления инфекционных процессов, вызванных микробами и микроорганизмами, проводятся бактериологические посевы, способные определить вид микроорганизма и предотвратить размножение бактерий. В зависимости от среды обитания бактерий, методы посевов также имеют отличия, позволяющие получить чистую культуру микроорганизмов, не содержащую бактерии другого вида.

Обследуя пациента, которого тревожат те или иные проблемы со здоровьем, доктор назначает бактериологический посев, который может подтвердить предположение доктора о проникновении патогенного возбудителя, нарушение нормальной микрофлоры или чрезмерное размножение . Результаты анализа показывают:

  • вид возбудителя и его название на латинском языке;
  • концентрацию и количество бактерий;
  • патогенность микроорганизма.

При исследовании некоторых биологических материалов основной единицей измерения является КОЕ\мл , которая сообщает о количестве колониеобразующих единиц бактерий на миллилитр биологического материала. При анализе на патогенные микробы результаты исследования могут оказаться положительными или отрицательными. Получая анализы исследования, сообщающие о наличии или превышающие показатель колониеобразующих единиц, назначается повторный анализ, подтверждение которого информирует об инфекционном процессе в организме и требует лечения.

При исследованиях патогенного микроорганизма, выявленного во флоре, проводятся дополнительные анализы – посев микрофлоры , показывающие чувствительность организма к антибиотикам, которые могут устранить . Действующие препараты, к которым микробы проявляют чувствительность, обозначаются буквой S, антибиотики неспособные устранить заболевание – R.

Данное исследование помогает точно определить вид антибиотика, способного бороться с патогенным заболеванием без нанесения вреда организму.

Подготовка к бактериологическому посеву

Исследованию может подлежать любой биологический материал. Основным материалом для анализа служат:

  • кожа;
  • кровь;
  • сперма;
  • слизистая оболочка ротовой полости;
  • слизистая оболочка дыхательных путей;
  • слизистая мочеиспускательных путей;
  • сок желудочно-кишечного тракта;
  • органы слуха, зрения, обоняния.

Бактериологический посев требует подготовки и соблюдения определенных правил. Анализ крови совершается врачами и не требует серьезной подготовки, а назначенный урологом или гинекологом анализ мочи или мазок слизистой половых органов, требует выполнения правил перед анализом. Анализ мочи у женщин может захватить непатогенные кокки, но при этом моча остается стерильной, мужской анализ мочи может захватить непатогенные бактерии, стафилококки, дифтероиды. Чтобы увеличить качество исследуемого биологического материла, и избежать повторного анализа, необходимо обеспечить максимальную стерильность.

  1. Перед анализом необходимо уделить время гигиене половых органов;
  2. Женщинам, которым необходимо сдать мочу на анализ, следует закрыть вход во влагалище ватным тампоном;
  3. Анализ проводится на средней порции мочи, составляющей примерно 10 мл;
  4. Время обработки мочи, взятой на посев, - не более 2 часов.

При посеве из прямой кишки, уретры, влагалища, шейки матки процедура проходит в медицинских учреждениях, однако требует выполнения одного правила перед анализом: накануне посева запрещено спринцевание, подмывание и использование любых антисептических средств .

Время исследования и анализа биологического материала зависит от самого материала, таким образом, период ожидания результата может занять от 3 до 14 дней . Стоимость анализа также зависит от вида посева, но в некоторых случаях в поликлинике по назначению врача и в женской консультации посев осуществляется бесплатно. Для беременных женщин бактериологический посев является обязательной процедурой и должен проводиться дважды, второй раз включает посев слизистой оболочки носа и рта.

Интересные факты о бактериологическом посеве

Патогенные гонококки, которые можно выявить путем бактериологического посева, осваиваются в организме на третий день, провоцируя гонорею, постепенно захватывающую весь организм. Для выявления болезни проводятся посев, культивирование, микроскопия и другие анализы.

Иногда в мазке половых путей при анализе выявляются диплококки - парные «кофейные зерна». Данная находка не указывает на венерическое заболевание, оно появляется в постменопаузе.

Посев мочи назначается только в необходимом случае, так как требует серьезной и трудной работы, поэтому врачи часто избегают анализа мочи.

Большое количество анализов требует , которую довольно тяжело диагностировать. Инфекцию определяют с помощью посева, затем культивируют, изучая чувствительность к антибиотикам и различным терапиям.

Беременность предоставляет уникальные возможности для маскировки микроорганизмов. Поэтому бактериологические посевы являются обязательной программой для беременных женщин.

Все бактериологические посевы и анализы – это безболезненные процедуры, которые, однако, помогают выявить болезнь и найти средство для ее устранения.

Методы проведения бактериологического посева

Для выявления микроорганизмов используются приспособления, позволяющие перенести материал на среду в стерильных условиях. Процедура осуществляется бактериальной петлей , пастеровской пипеткой или стеклянной палочкой . Приспособления, известные медицинским работникам с XIX века, прошли через изменения и усовершенствования, появились улучшенные стерильные способы использования инструментов благодаря одноразовым пластиковым приспособлениям.

Процедура проводится в стерильных условиях рабочей зоны, обработанной дезинфицирующими средствами. Медработники используют стерильные перчатки, которые, как одежда и рабочая зона, должны быть обработанными средствами, не мешающими выделению изолированных штаммов. Время посева должно быть минимальным, но процедура требует внимательность и аккуратности.

Выделение штаммов и исследование чистых культур

Из-за особенностей некоторых микроорганизмов, которые требуют индивидуального подхода и изучения, выделение штаммов проходит различными способами, подходящими под исследование бактерий определённых видов. Таким образом, мазок может помещаться в определённую среду, которую через некоторое время следует сменить другой средой. В некоторых случаях жидкость следует центрифугировать, а затем изучить осадок с помощью посева.

Бактериологический посев позволяет определить размер, форму, тип бактерии, наличие жгутиков, спор или капсул на теле микроорганизма, а также определить свойства бактерий к окрашиванию. Данные исследования информируют медицинского работника, делающего анализ, о наличии заболеваний, патогенных бактерий, и возможностях выделения отдельной клетки, что делает анализ посева важным этапом научных целях для изучения генетических исследований.

Бактериологическое исследование - это исследование, предназначенное для выделения и изучения их свойств с целью постановки микробиологического диагноза.

Исследуемый материал следует брать в асептических условиях в стерильную посуду и доставлять в лабораторию возможно скорее. В случае необходимости пробы следует хранить на холоде. Методика взятия проб зависит от объекта, характера заболевания и свойств микроорганизма. Одним из распространенных приемов бактериологического исследования является бактериоскопия.

Для изучения нефиксированных бактерий пользуются двумя методами: раздавленной (между предметным и покровным стеклами) капли и . Следует помнить, что препараты нефиксированных бактерий заразны.

Для бактериоскопии фиксированных препаратов используют мазки. Для их приготовления каплю исследуемой жидкости распределяют по поверхности предметного стекла, а затем высушивают. Наиболее распространенным методом фиксации препарата является пронесение его через пламя газовой горелки. В некоторых случаях используют фиксирующие составы. Фиксированные препараты, как правило, окрашивают (см. Окраска микроорганизмов). К числу важнейших элементов бактериологического исследования относятся посевы и пересевы , производимые бактериальной петлей или пастеровской пипеткой. Петлю стерилизуют прокаливанием в пламени, затем ее остужают прикосновением к участку незасеянного агара или ополаскивая в стерильной жидкости. При использовании пастеровской пипетки ее кончик обламывают пинцетом, несколько раз проносят пипетку через пламя горелки и дают остыть. При посевах используют жидкие и твердые питательные среды. При посеве на скошенный агар культуру бактерий растирают петлей по поверхности агара. При посеве в толщу агарового или желатинового столбика питательную среду прокалывают до дна пробирки петлей или особой иглой. При посеве в жидкую среду надо следить, чтобы жидкость не выливалась и не смачивала края пробирок и пробки. Посевы и пересевы следует проводить вблизи пламени газовой горелки, пробирки не должны долго оставаться открытыми, петля или пастеровская пипетка с культурой не должна ни к чему прикасаться; перед тем как закрывать пробирку, края ее следует прожечь. Засеянные пробирки необходимо тотчас же надписать.

Важнейшим этапом бактериологического исследования является идентификация - определение видовой или типовой принадлежности бактерий, полученных в виде чистой культуры. При идентификации бактерий производится изучение их физиологических и биохимических свойств, токсинообразования. Широко используют серологические методы идентификации бактерий (реакции и ). Во многих случаях эффективным оказывается биологический метод идентификации микроорганизмов, основанный на заражении лабораторных животных исследуемым материалом или полученной культурой бактерий и выявлении у животных характерных патологических изменений.

Для выделения чистых культур используют механические и биологические методы. Пример механического метода: каплю исследуемого материала растирают одним и тем же стерильным шпателем или бактериальной петлей по поверхности плотной питательной среды, последовательно в первой, второй и третьей . Выделение чистой культуры производится из выросших отдельных колоний и заключается в их исследовании и отсеве на свежую питательную среду. Биологические методы выделения чистых культур основаны на учете того или иного свойства выделяемого микроба, отличающего его от других микробов, находящихся в исследуемом материале.

При биологическом методе используют такого рода питательные среды, в которых созданы условия, благоприятные для развития определенного вида микробов. К числу биологических методов относится также заражение лабораторных животных, чувствительных к выделяемому виду бактерий.

Бактериологическое исследование - комплекс методов для выявления патогенных микроорганизмов у больного, у носителя или на объектах внешней среды. Бактериологические исследования пользуются также для обнаружения условно патогенных и санитарно-показательных микробов, характеризующих степень загрязнения внешней среды, для изучения микробного пейзажа определенной среды (объекта). Бактериологическое исследование может быть использовано для диагностики, профилактики инфекционных заболеваний, для санитарно-гигиенической характеристики среды, окружающей человека, для научного исследования.

Материал и метод бактериологического исследования зависят от цели анализа, условий среды, патогенеза и течения заболевания. При наличии бактериемии микроб обнаруживают при помощи посева крови. В случаях выраженных местных поражений возбудителя следует искать в отделяемом или выделениях пораженного органа (дифтерия, дизентерия, гонорея и др.). Наконец, при заболеваниях со сложным течением, когда (как, например, при брюшном тифе) бактериемия сменяется поражениями тонких кишок, на каждом этапе применяют соответствующий метод исследования: в течение первой недели заболевания производят посев крови, на второй наиболее достоверно серологическое исследование, начиная с третьей недели положительный результат получают при посеве испражнений; последним методом пользуются и в качестве контрольного исследования для обнаружения бактерионосителей среди реконвалесцентов и для наблюдения за ними.

Выполнение любой из указанных задач осуществляют применением методов, предназначенных для выделения и определения микроорганизмов. В зависимости от характеристики микроба используют весь комплекс методов или его части.

Бактериоскопия - наиболее достунный прием, основанный на микроскопическом изучении материала. При микроскопии свежих препаратов можно пользоваться некоторыми микрохимическими реакциями (например, окраска йодофильных бактерий раствором Люголя) или избирательной окраской разных структурных частей бактерий.

Более четко бактерии можно выявить в окрашенном препарате. Исследуемый материал наносят на предметное стекло тонким и по возможности ровным слоем. Дают препарату высохнуть на воздухе и фиксируют одним из общепринятых методов, но чаще всего фламбированием, т. е. двух-, трехкратным быстрым проведением препарата над пламенем горелки так, чтобы стекло было теплое, но не горячее. Препарат, остуженный после фиксации, окрашивают простой или дифференциальной окраской (см. Окраска микроорганизмов). При флюоресцентной микроскопии используют как нативные, так и сухие препараты. В этом случае обработка определенными красителями вызывает свечение структур микробного тела или всего микроба в ультрафиолетовых или коротких синих лучах. В другой модификации микробов обрабатывают специфическими сыворотками, меченными флюоресцентами (красителями). Бактерии, соответствующие сыворотке, будут светиться, так как на них осядет меченая сыворотка. Гетерологичные бактерии не будут светиться.

Методом бактериоскопии широко пользуются для бактериологической диагностики некоторых инфекционных заболеваний (гонорея, туберкулез, возвратный тиф), а также при изучении всего комплекса микрофлоры органа (миндалины, влагалище), продукта или другого объекта.

Метод посева, т. е. выделение чистой культуры искомого микроорганизма, является более точным и надежным способом бактериологической диагностики, чем бактериоскопия. Свежий материал размазывают по поверхности плотной питательной среды, налитой в чашки Петри. Первичный посев производят на обычные среды, благоприятные для данного микроба, на дифференциальные или на селективные среды. Выбор питательной среды (см.), как и метода предварительной обработки свежего материала для посева, зависит от степени его загрязнения сопутствующей посторонней микрофлорой. Через 24-48 час. содержания в термостате при оптимальной для данного микроба температуре чашки рассматривают и подозрительные колонии пересевают на среды, способствующие размножению данного возбудителя. Таким образом получают культуру однородных бактерий, которые и должны быть идентифицированы.

Идентификация микроба начинается с изучения его морфологии в окрашенном препарате и в раздавленной капле (см.) для определения формы микробов и их подвижности. Следующим этапом является исследование ферментативной способности бактерий по расщеплению углеводов, аминокислот, мочевины в определенных для каждого вида сочетаниях. У бактерий наиболее изучены сахаро- и протеолитические ферменты.

Идентификация микроба должна быть дополнена изучением других свойств, характерных для каждого рода и вида микроорганизмов. К таким свойствам относится способность выборочно растворять эритроциты разных животных (гемолиз), свертывать плазму крови (плазмокоагуляция), растворять сгусток фибрина (фибринолиз) и пр. Все эти особенности бактерий могут быть использованы при их определении как дифференциальные признаки.

Окончательное определение микробов некоторых видов, в основном патогенных бактерий семейства кишечных, включает серологическую идентификацию (см. Идентификация микробов). Обычно для этого ставят реакцию агглютинации, т. е. выявляют скучивание бактерий под влиянием одноименной иммунной сыворотки. Агглютинация микробов в сыворотке против определенного вида указывает на принадлежность к этому виду. Обычно реакцию агглютинации ставят ориентировочно на стекле и для окончательного определения в пробирках с разведениями сыворотки.

Ряд микробов не удается определить до конца описанным путем. Тогда идентификацию необходимо дополнить заражением лабораторных животных, поскольку для некоторых бактерий характерна патогенность или токсигенность, выявляющаяся при заражении животных. В некоторых случаях заражение животных служит также методом накопления патогенных микробов.

Только сопоставление всех характеристик культуры, собранных при изучении морфологии, биохимических, серологических, а где нужно и биологических свойств ее, может дать основания для идентификации. Ответ при положительном результате исследования не представляет затруднений, если выделенный микроб типичен. В таком случае указывают род, вид и, если определялся, тип бактерии. При выделении микроба, отклоняющегося по каким-то свойствам от типичной характеристики, дается ответ с указанием на отклоняющийся признак. В таком случае полезно повторить исследование, если позволяет течение болезни или условия сбора материала. Полезно также подвергнуть культуру атипичных микробов дополнительному изучению другими, более сложными методами.

Отрицательные результаты бактериологического исследования имеют относительное значение и показывают лишь, что в исследованной порции материала искомые микробы не содержались или были нежизнеспособны. Однако они могут присутствовать в другой порции. По этому, например, при обследовании на бациллоносительство (брюшной тиф, дизентерия, дифтерия) требуется проводить повторные исследования.

Исследование, применяемое для выявления патогенных бактерий в материале от больных животных или их трупов, обнаружение микробов в объектах внешней среды, кормах, мясе и т. д. Характер и методика взятия проб, способ пересылки материала при различных инфекционных болезнях неодинаковы, но существуют общие положения, которые необходимо учитывать независимо от объекта исследования и свойств материала. Исследуемый материал по возможности собирают в асептических условиях в стерильную посуду и доставляют в ближайшее время с сопроводительным документом в лабораторию (в нём указаны дата взятия, характер и источник материала, основные клинические признаки болезни и патологоанатомические изменения, цель исследования). Б. и. включает 3 основных метода: микроскопию (бактериоскопию) мазков из патологического или др. исследуемого материала; выделение чистой культуры бактерий с последующим изучением морфологических, культурально-биохимических, антигенных и патогенных свойств бактерий.

Бактериологическое исследование начинают с микроскопии, что позволяет обнаружить в материале микробов, изучить их морфологию (форму, размер, строение). При микроскопии патологического материала готовят мазки-отпечатки из органов, тканей или тонкие мазки из другого исследуемого материала, высушивают их на воздухе, фиксируют (чаще фламбированием) и окрашивают тем или иным методом в зависимости от направленности исследования (см. Окраска микроорганизмов). Для обнаружения некоторых бактерий (например, возбудителя туберкулёза) патологический материал предварительно обрабатывают одним из методов обогащения, чтобы повысить в нём концентрацию бактерий и избавиться от посторонних микробов. Для ускоренного обнаружения бактерий применяют люминесцентную микроскопию. Для изучения подвижности бактерий, обусловленной наличием жгутиков, используют микроскопию молодой (12-24 ч) живой культуры с помощью препаратов висячей капли или раздавленной капли. Подвижность бактерий может быть установлена также на основе особенностей роста культуры в полужидком МПА. Выделение культуры бактерий проводят путём посева материала на среды питательные. Чтобы облегчить и ускорить выделение бактерий, используют дифференциально-диагностические и элективные питательные среды (плотные и жидкие), на которых определённые виды бактерий дают характерный для них рост (при этом задерживается рост посторонних микробов). Посев на плотные питательные среды в бактериологических чашках проводят путём растирания шпателем нескольких капель материала по поверхности среды. При исследовании паренхиматозных органов убитых или павших животных обжигают или фламбируют кусочек органа, затем надрезают его стерильными ножницами и с помощью пинцета проводят надрезанной поверхностью по питательной среде в чашке. В жидкую среду посев материала делают пастеровской пипеткой. Чтобы получить рост изолированных колоний микробов на плотной среде и отделить исследуемые бактерии от сопутствующих микроорганизмов, проводят дробный посев по методу Дригальского. Засеянные чашки и пробирки инкубируют в термостате при оптимальной для роста каждого вида бактерий температуре (чаще 37°C) в течение 1-2 сут, в некоторых случаях (туберкулёзные бактерии) - до 3-4 нед. Наиболее длительный и сложный этап Б. и. - родовая и видовая идентификация выделенных культур. Изучают только чистые культуры, полученные после пересева из одной колонии и имеющие идентичные морфологические и тинкториальные свойства (см. Идентификация микробов). Антигенные свойства культуры изучают в реакции агглютинации. Определение патогенных свойств бактерий проводят путём заражения лабораторных животных культурой или фильтратом культуры (при определении токсинообразования).

После изучения свойств бактерий сопоставляют полученные данные с признаками бактерий, имеющимися в классификационных схемах или определителях микробов (Д. Берджи, 1974; Н. А. Красильников, 1949, и др.), и проводят их родовую и видовую дифференциацию. В сомнительных случаях проводят повторное исследование материала. Результаты Б. и. записывают в регистрационный журнал или на бланке лабораторной экспертизы, в заключении которой указывают, какой микроб выделен из исследуемого материала. Диагноз на инфекционную болезнь может быть поставлен только при учёте эпизоотологических, клинических и патологоанатомических данных.

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ , ыи- кробиологич. анализ, служит для обнаружения различного рода микроорганизмов и определения их вида в подлежащем обследованию материале (в почве, воде, продуктах разного рода, отделениях животных и т. д.); состоит в изучении биологии микроба (его морфологических, биолог, и иммунологических свойств), а для патогенных микробов также и в определении их способности вызывать у экспериментальных животных специ-фич. пат. процессы. Изучение морфологии микробов производится при помощи микроскопа, для чего материал, подлежащий обследованию, подвергается предварительной обработке с тем, чтобы сделать микробов ясно видимыми среди неорганизованного распада, в к-ром они обычно находятся. Достигается это окрашиванием препаратов из исследуемого материала различными естественными или искусственными красками. Так как мертвые микробы окрашиваются 6»1 лучше, то препараты предварительно подвергаются т. н. фиксированию, т. е. обработке разного рода физич. и хим. агентами, быстро убивающими протоплазму-■ жаром, спиртом и т. д. Иногда материал микроеко-пируется и без предварит, обработки, когда требуется по ходу анализа изучение под микроскопом живых микробов (наблюдение подвижности их, отношения к О и пр.). В таких случаях приготовляется препарат в виде т. н. висячей капли. Наблюдение ведется или обычным способом или при затемненном поле зрения микроскопа. При исследовании на присутствие Protozoa весь анализ ограничивается одним микроскопированием, что считается достаточным, т. к. методы культивирования протозоа очень сложны и в широкую практику еще не вошли. В бактериологии анализ не останавливается на изучении формы микроба. Необычайно широкая изменчивость бактерий при ничтожнейших изменениях окружающей среды, прежде всего отражается на форме их; изучение только одной формы микробов привело бы к грубейшим ошибкам при определении их вида. Поэтому, для суждения о виде микроба необходимо знание, кроме морфологии,-и всех его биол. особенностей, его биохим. и иммунологических свойств, а для патогенных-и результата опыта на животном; только совокупность всех этих данных дает возможность б. или м. точно идентифицировать того или иного микроба, определить вид и тип его. Этому и служит вся бактериологическая техника. Культивирование микробов на искусственных питательных субстратах для изучения их биохим. свойств является главнейшим моментом Б. а. В настоящее время такое культивирование встречает еще ряд затруднений. Многих микробов и теперь еще нельзя получить в искусственных культурах. Препятствием служит ряд условий, заключающихся в необычайном разнообразии микробного мира, в резко выраженной специфичности биохим. функций микробов и вытекающей отсюда их изменчивости. Наше незнание многих из этих условий не дает возможности подобрать такие питательные среды, к-рые всегда были бы пригодны. Тем не менее, именно культивирование доступных нам микробов является основным методом их Б. а. В наст, время Б. а. начинается с получения отдельных микробов, подлежащих изучению, в чистых культурах, т. е. в культурах, состоящих из одного вида микроба, без примеси какого-либо другого. Достигается это тем, что материал, подлежащий изучению, распределяется на поверхности твердых питательных сред. Это распределение имеет целью отделить микробов друг от друга. Через известный период времени, чаще всего через сутки, на тех местах субстрата, на которых оказались микробные клетки, образуются скопления микробов, т. н. колонии разросшегося микроба. Эти колонии у многих микробных видов имеют очень характерную форму, чем и пользуются для первого ориентирования в составе микробной флоры. Отдельные колонии извлекаются и переносятся на подходящие питательные среды для дальнейшего культи- вирования. Предполагается, что каждая колония вырастает из одной клетки; но это бывает не всегда, и последнее время все больше и больше в практику входит способ получения колоний из заведомо одной микробной клетки. Такое отделение микроба производится под контролем глаза в микроскопе с помощью прибора, называемого микроманипулятором. Т.к. материал, подлежащий обследованию, заключает в себе огромное количество разнообразных микробов, выделить же необходимо одного определенного из них, то в таких случаях применяются особые питательные среды. В последних или содержатся хим. вещества, вступающие между собой во взаимодействие под влиянием роста микробов, что обнаруживается каким-либо легко доступным проявлением, напр., изменением цвета, выпадением или растворением осадка (среды Эндо, Дригальского, среды с мелом, с кровью), или эти среды заведомо благоприятствуют росту искомого микроба и подавляют рост микробов сопутствующих, напр., среды обогащения для тифа, дифтерии. Только после такой предварительной обработки получают чистые культуры. В тех случаях, когда искомый микроб находится в исходном материале в очень незначительном количестве и трудно поддается непосредственному культивированию, прибегают к опыту на животных (tbc). Материал впрыскивают животному, и после того, как разовьются характерные для данного микроба пат. изменения, выделяют чистую культуру. Получив чистую культуру, приступают к изучению биохим. особенностей данного микроба. Т. к. состав питательных сред очень сложен, то для изучения биохимии к средам прибавляются различные, химически более простые вещества, изменения которых под влиянием роста микробов легко могут быть обнаружены прибавлением какого-либо индикатора-лакмуса,нейтраль-рота и др. Для этой цели служат различные углеводы, моно-, ди-, полисахариды и многоатомные спирты, а также желатина и кровь (эритроциты). На основании изменения того или иного из этих веществ заключают о биохимич. особенностях данного микроба. Громадное значение при определении вида микроба имеет иммунологический метод, основанный на способности животного организма крайне специфически реагировать на парэнтеральное введение инородных белков образованием и накоплением в крови различных т. н. антител. Сыворотка крови таких животных и служит реактивом. В ней присутствие этих антител легко может быть обнаружено рядом простых реакций. Некоторые из этих реакций получили широкое распространение и являются обязательными при идентификации микробных видов. Эти реакции-агглютинация, преципитация и реакция отклонения комплемента. Для непатогенных микробов Б. а. на этом может быть закончен. Для микробов же патогенных обязателен еще эксперимент на животном, особенно при обнаружении нового вида. Идеалом определения всякого патогенного микроба является получение у подходящего животного патологич. изменений, вызываемых данным микробом в естеств. условиях. Однако, наши знания необходимые для такого опыта условий далеко не полны, почему опыты и бывают часто безуспешными. Затем, пат.-анат. данные, полученные в результате опыта, не всегда могут быть достоверны, т. к. видимое здоровое состояние животного ничего не говорит о перенесенных им инфекциях и друг, заболеваниях; обнаруженные изменения, могут быть результатом уже ранее перенесенных заболеваний. Все эти соображения заставляют очень осторожно относиться к получаемым при эксперименте результатам и никогда не удовлетворяться одним удачным опытом. Все же в тех случаях, где реакция со стороны опытного животного по отношению к данному микробу строго определенна и постоянна (как, напр., отношение морской свинки к дифтерии или tbc, или кролика к оспе и бешенству), там эксперимент на животном является обязательным. Б. а. без такого эксперимента недостаточно убедителен. В нек-рых случаях при удачном опыте необходимо выделить в чистой культуре того микроба, который послужил для эксперимента, и идентифицировать его с исходным. Это необходимо потому, что часто введение в животный организм инородного материала пробуждает дремлющие там патогенные процессы и вызывает генерализацию ограниченного страдания, повышая активность находящихся там микробов. При выделении чистой культуры надо поэтому иметь в виду, что можно выделить не исходного микроба, а микроба, случайно находившегося в организме. Кроме того, кровь многих, видимо здоровых, животных содержит в себе различных микробов, к-рые также могут быть выделены и могут ввести в заблуждение исследователя. Общая схема хода Б. а. может быть представлена в таком виде: 1) изготовление препаратов из подлежащего обследованию материала; фиксация их; 2) микроскопирова-ние а) в неокрашенном виде, б) в окрашенном виде; 3) посев на агаровые пластинки для выделения чистой культуры; если необходимо, то после предварительного посева на избирательные или обогащающие среды; 4) биохим. анализ; 5) реакции иммунитета; 6) эксперимент на животных. Целью Б. а., кроме определения вида бактерии, служит и установление его места в систематике микробов. Однако, систематика микробов еще недостаточно разработана, вернее, существует несколько систематик, очень неполных, построенных на различных основах. Все это затрудняет точность анализа. В 1917 г. американские микробиологи создали специальную комиссию, к-рая и разработала систематику бактерий, базируясь, гл. обр., на их иммуно-биологических особенностях и свойствах, обнаруживаемых в культурах. Эта комиссия проверила характеристики всех известных микробов в указанном выше смысле, и результаты ее работ опубликованы. Все выходящие теперь на англ. яз. работы уже придерживаются номенклатуры, принятой в этом руководстве. Лит.: Златогоров С. И., Учение о микроорганизмах, П., 1914; Т а р а с е в и ч Л. А., Ме- дицинская микробиология, Киев, 1910; Омелян-с к и й В. Л., Основы микробиологии, М.-Л., 1926; К о 1 I e W. u. Wassermann A., Handbuch d. path. Mikroorg., В. I, 2 Ausg., Jena, 1912; К о 1 m e r J., Infection, immunity a. biologic therapy, L., 1924; Bergey H., Manual of determinative bacteriology, L., 1927; P a r k W. a. Williams A., Pathogenic microorganisms, N. Y., 1925; В e s s о n A., Technique microbiologique, P., 1925; Wadsworth A., Standard methods, N. Y., 1927.А. Челышй.